Митрофаньевское шоссе располагается в Адмиралтейском и Московском районах Санкт-Петербурга (исторический район Горячее поле). Пролегает между набережной Обводного канала и линией Соединительной железной дороги. Общая протяженность составляет 2920 метров. История улицы началась в середине XIX века, тогда она именовалась Большой Митрофаньевской дорогой. Такое название связано с одноименным кладбищем. Современное название получила в конце XIX века. Ближайшие станции метро: «Балтийская», «Московские ворота», «Электросила». По шоссе ходит автобус № К281. Также у начала Митрофаньевского шоссе находится Балтийский вокзал.